CIRBP对小鼠血管平滑肌细胞增殖及迁移的调控及机制研究

Regulatory effect of cold-inducible RNA-binding protein on proliferation and migration of mouse vascular smooth muscle cells and its mechanism

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摘要目的:探讨冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)对小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及迁移过程的调控及机制.方法:将雄性C57BL/6J小鼠分为假手术对照组、假手术干扰组、颈总动脉损伤对照组和颈总动脉损伤干扰组,每组5只.造模后按照组别分别用阴性对照腺病毒(AD-NC)和沉默CIRBP腺病毒(AD-CIRBPI)转染,28 d后观察CIRBP表达及血管内膜的增生情况.将小鼠VSMCs分为对照组和腺病毒沉默组,分别用AD-NC和AD-CIRBPI转染细胞48 h,然后加入激活雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)活性的胰岛素.通过RT-qPCR检测CIRBP的mRNA表达,Western blot检测CIRBP、磷酸化核糖体蛋白S6(p-S6Ser235/236)和磷酸化4E结合蛋白1(p-4EBP1Thr37/46)蛋白水平变化,Ki67免疫荧光染色和CCK-8实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,HE染色检测颈动脉内膜增生程度.结果:沉默CIRBP后,VSMCs的活力下降,Ki67阳性细胞比率降低,细胞迁移速度减慢,同时mTORC1活性下降.加入胰岛素恢复mTORC1活性后,细胞活力、Ki67阳性细胞率和细胞迁移速度下降幅度减弱.损伤小鼠颈总动脉内皮后CIRBP表达增加,体内干扰小鼠CIRBP表达后,小鼠血管内皮损伤后内膜增生程度减轻.结论:CIRBP通过mTORC1途径加强小鼠VSMCs增殖及迁移,促进小鼠血管损伤后血管内膜增生.