换一批小鼠囊胚胞外囊泡对子宫内膜上皮细胞E-cadherin和vimentin表达的影响
Mouse blastocyst-derived extracellular vesicles regulate expression of E-cadherin and vimentin in endometrial epithelial cells
摘要目的:探讨小鼠囊胚细胞外囊泡(EVs)对小鼠子宫内膜上皮细胞(mEECs)上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响.方法:以孕4.5 d的BABL/c小鼠囊胚为材料,利用超高速离心分离纯化小鼠囊胚EVs,粒度仪分析粒径,透射电子显微镜观察形态,Western blot分析Tsg101和CD63的表达;酶消化结合差速贴壁筛选法制备原代mEECs,流式细胞术分析细胞角蛋白8(CK8)的阳性率鉴定mEECs纯度.建立囊胚EVs与mEECs共培养模型,共聚焦显微镜观察PKH26标记的囊胚EVs进入mEECs的形态过程,Western blot和细胞免疫化学法分析共培养中mEECs中E-cadherin和vimentin表达的变化.结果:(1)小鼠囊胚EVs平均粒径(226.6±3.8)nm,表现囊泡超微形态,表达Tsg101和CD63蛋白标志物.(2)原代mEECs形态均匀,CK8阳性细胞率80％以上.(3)与0 h相比,mEECs与囊胚EVs共培养48和96 h时E-cadherin表达水平显著降低(P<0.01),vimentin表达水平显著升高(P<0.01).结论:小鼠囊胚EVs可下调E-cadherin表达,上调vimentin表达,诱导mEECs发生上皮-间充质转化.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-4718.2023.02.017
发布时间
2023-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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