小鼠成肌细胞低氧/复氧模型的建立及验证

Establishment and verification of a mouse myoblast hypoxia/reoxygenation model

二维码有效期 120s

摘要目的:构建体外小鼠成肌细胞间歇性低氧/复氧模型并验证.方法:设定三气培养箱的混合气中1%或4%O2含量为低氧培养条件,二氧化碳培养箱中的条件为复氧条件,将小鼠成肌细胞(C2C12)分别按不同氧浓度(1%和4%)及复氧循环周期(6 h和8 h)处理,结束后观察细胞增殖情况,测定细胞培养液中葡萄糖、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)及分泌性蛋白质分子——含Ⅲ型纤连蛋白结构域蛋白5(fibronectin type Ⅲ domain containing 5,FNDC5)浓度,测定细胞低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白的表达水平.结果:(1)1%低氧浓度组较4%低氧浓度组细胞增殖慢、FNDC5含量低,培养液中葡萄糖浓度高、LDH活性及细胞中HIF-1α蛋白表达较高(P<0.05).(2)1%低氧浓度条件下,与循环周期6 h组相比,循环周期8 h组细胞活力显著下降(P<0.05).结论:本研究模拟了体外小鼠成肌细胞在不同低氧/复氧条件下的损伤状况及FNDC5的差异表达,1%低氧浓度和复氧循环周期6 h可作为较佳的体外C2C12细胞实验模型建立条件.