差异过筛法体外分离培养原代大鼠脑微血管内皮细胞及其鉴定
Utilizing differential sieving method for culturing primary rat brain mi-crovascular endothelial cells
摘要目的:采用差异过筛法培养纯度高、活性好的原代大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs).方法:取4周龄SD大鼠脑皮质,经剪碎、细胞筛网过滤、收集网下滤过物、Ⅱ型胶原酶消化后,置于CO2培养箱中进行原代培养.通过细胞形态学观察、血管性血友病因子(vWF)免疫细胞化学染色鉴定所培养的目的细胞.结果:培养24 h后血管段周围爬出短梭形的细胞;48 h后岛屿状的细胞集落形成;72 h后细胞铺满瓶底,呈典型的单层、铺路石样、镶嵌式贴壁生长;免疫细胞化学染色显示,所培养细胞的细胞质呈现棕红色,vWF表达为阳性.结论:差异过筛法能够成功分离培养出原代大鼠BMECs.
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