摘要目的:探讨抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的E3泛素连接酶活性对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PH)大鼠肺血管重构以及相关信号通路的影响.方法:采用随机数字表法将42只SPF级健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠分为4组:对照组(n=6)、MCT模型组(n=15)、C25-140(TRAF6特异性E3泛素连接酶活性抑制剂)组(n=6)和MCT+C25-140组(n=15).MCT及MCT+C25-140组大鼠于实验开始时颈后皮下单次注射MCT 60 mg/kg,建立PH模型,其他2组大鼠皮下注射5%DMSO作为对照.C25-140组及MCT+C25-140组大鼠于第14天、21天和28天腹腔注射9.8 mg/kg C25-140.第28天行超声心动图检测评估大鼠肺动脉压力和心室收缩力变化,之后对大鼠进行安乐死并取肺组织.通过HE染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色评估大鼠肺血管形态;采用免疫共沉淀检测大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中信号转导及转录激活因子3(STAT3)的K63泛素化水平;Western blot检测大鼠肺组织中TRAF6、STAT3、p-STAT3及cyclin D1的表达水平;免疫荧光染色观察大鼠肺血管TRAF6和STAT3的共定位情况.结果:(1)与对照组比较,MCT组大鼠肺动脉血流加速时间(PAAT)和三尖瓣环平面收缩期位移(TAPSE)明显减少(P<0.05),血管中膜厚度明显增加(P<0.05),α-SMA免疫荧光染色显示肺小血管明显肌化,提示造模成功.(2)与对照组相比,PH大鼠PASMCs中STAT3的K63泛素化明显升高.(3)MCT干预后28天,大鼠肺组织中TARF6、p-STAT3/STAT3比值及cyclin D1水平相对于对照组显著升高(P<0.05);与MCT组相比,MCT+C25-140组大鼠PAAT、TAPSE明显上升(P<0.05),血管中膜厚度明显减小(P<0.05).给予C25-140处理后,肺组织中TARF6、p-STAT3/STAT3比值及cyclin D1水平相对于MCT组显著降低(P<0.05).(4)免疫荧光染色的结果显示MCT组大鼠肺小动脉中膜TRAF6与STAT3存在显著共定位,C25-140处理能显著抑制两者的相互作用.结论:抑制TRAF6的E3泛素连接酶活性可降低肺血管STAT3的磷酸化,下调cyclin D1表达,而且能减缓PH大鼠肺动脉中膜增厚,减轻肺血管重构.