NLRC3在血管内皮细胞中的功能初探及在冠心病中的诊断价值
Function of NLRC3 in endothelial cells and its diagnostic significance in coronary artery disease
摘要目的:探讨NLR家族含CARD域蛋白3(NLR family CARD domain containing 3,NLRC3)在血管内皮细胞中的功能及在冠心病中的诊断价值.方法:取20只8周龄雄性ApoE-/-C57BL/6小鼠,分为实验组及对照组(各10只),实验组采用高脂饮食喂养8周诱导动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS),对照组采用普通饮食喂养;采用RT-qPCR及免疫荧光检测主动脉NLRC3的表达;采用白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β;10 μg/L)刺激人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),检测NLRC3的表达变化;采用慢病毒载体或质粒载体在内皮细胞中过表达或敲减NLRC3的表达并用IL-1β诱导炎症,采用RT-qPCR和ELISA检测NLRC3对内皮细胞炎症的影响,采用Western blot和免疫荧光检测NLRC3对内皮细胞NF-κB信号通路的调控;采用ELISA检测冠心病患者及对照患者血浆NLRC3的表达水平,通过受试者工作特征曲线评估检测NLRC3在冠心病诊断中的价值.结果:AS小鼠主动脉中可观察到明显的粥样斑块病变;NLRC3在AS小鼠主动脉弓的表达较对照组小鼠下调;NLRC3在IL-1β刺激的HUVECs中显著下调,并呈现时间依赖性(P<0.01)和剂量依赖性(P<0.01);过表达NLRC3显著抑制IL-1β刺激的内皮细胞IL-6、IL-8、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoatbactant protein-1,MCP-1)、p-p65及p-IκBα的表达(P<0.01),而敲减NLRC3则增加内皮细胞IL-6、IL-8、MCP-1、p-p65及p-IκBα的表达(P<0.01);NLRC3在冠心病患者血浆中的表达水平显著低于对照组,其诊断冠心病的曲线下面积为0.851,95%CI为0.785~0.918(P<0.01),当临界值为1.605 μg/L时,诊断灵敏度为93.8%,特异度为71.3%.结论:NLRC3可能通过抑制NF-κB通路调节内皮炎症影响AS的发展,并可作为冠心病诊断的潜在生物标志物.
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