换一批染料在聚丙烯酰胺上层凝胶电泳免疫印迹中的应用
Application of dyes in polyacrylamide upper gel electrophoresis and im-munoblotting
摘要目的:探讨染料Remazol BrOrange yellow(RBY)和赤藓红(erythrosine,ERY)分别用于十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺浓缩胶染色后对免疫印迹分析效果的影响.方法:将聚丙烯酰胺凝胶分为5组:对照组(按常规试剂盒步骤制备)、终浓度为0.08 g/L的RBY染色组、终浓度为0.16 g/L的RBY染色组、终浓度为0.08 g/L的ERY染色组和终浓度为0.8 g/L的ERY染色组.依次制胶进行电泳,结束后用考马斯亮蓝对电泳胶进行染色,观察蛋白条带;随后转膜,并进行PVDF膜封闭、Ⅰ抗及Ⅱ抗孵育、洗涤,最后进行曝光拍照,观察目的蛋白黏着斑蛋白(vincu-lin)条带.结果:与未染色浓缩胶相比,RBY或ERY预染色浓缩胶的上样孔更加清晰可见,且经 Marker显示和电泳后的凝胶考马斯亮蓝染色分析表明,RBY或ERY染色浓缩胶后,蛋白电泳能力与未染色浓缩胶无显著差异.蛋白免疫印迹对比分析也表明,转移到PVDF膜的蛋白样品检测不受影响.结论:RBY或ERY预染色浓缩胶可提高基于凝胶的电泳和免疫印迹分析的工作效率.
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关键词
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳Remazol BrOrange yellow赤藓红免疫印迹sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresisRemazol BrOrange yellowerythro-sineimmunoblotting
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-4718.2025.05.023
发布时间
2025-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
浙江省自然基金公益项目（No.LTGN24H090001）
浙江省自然基金公益项目（No.LGD22H020002）
浙江省卫生厅项目（No.2021KY778）
温州市基础性科研项目（No.Y2023066）
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