大鼠和小鼠胃平滑肌细胞的分离、鉴定及原代培养
Isolation,identification,and primary culture of gastric smooth muscle cells derived from rats and mice
摘要目的:建立大鼠和小鼠胃平滑肌细胞的分离、鉴定、原代培养及评价方法.方法:取SD大鼠和C57BL/6小鼠各30只,分别随机分为3组,每组10只,进行3次平行实验,无菌条件下分离原代胃平滑肌细胞.采用形态学观察、免疫荧光与蛋白印迹等方法对分离的细胞进行鉴定,流式细胞术分析细胞纯度,台盼蓝拒染法评价复苏后的细胞活力.结果:分离的大鼠和小鼠原代胃平滑肌细胞呈梭形或多边形;免疫荧光与蛋白印迹结果显示大鼠和小鼠胃平滑肌细胞均能表达α-平滑肌肌动蛋白;流式细胞术结果显示大鼠胃平滑肌细胞中阳性表达率为99.6%,小鼠胃平滑肌细胞中阳性表达率为97.4%.冻存后复苏的大鼠和小鼠胃平滑肌细胞的活细胞率可以达到97%以上.结论:本研究建立了稳定、可靠的大鼠和小鼠原代胃平滑肌细胞分离培养方法与评价指标.
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