摘要目的:从突触修剪的角度探讨直推督脉改善小鼠孤独症样行为的作用机制.方法:在孕鼠第12.5天腹腔注射丙戊酸(valproic acid,VPA)或等量生理盐水(saline)造模处理,子代小鼠标记为为saline组、模型(VPA)组和模型-督脉推法(VPA-DuMaiTuiFa,VPA-DMTF)组,每组各5只.VPA-DMTF组在出生第21天利用团队自主研发的推法刺激装置进行顺经直推督脉干预,持续21 d.干预结束后进行行为学检测,三箱实验检测小鼠社交偏好,旷场实验检测小鼠焦虑情况.取材小鼠大脑海马体,高尔基染色检测海马中树突棘的密度和数量以及未成熟树突棘的百分比,小胶质细胞标志物离子钙结合衔接分子1(ionized calcium-binding adapter molecule 1,IBA1)和小胶质细胞吞噬活性的溶酶体标志物CD68免疫荧光双染检测小胶质细胞吞噬功能,突触后密度蛋白95(postsynap-tic density protein 95,PSD95)和突触蛋白1(synapsin 1,SYN1)免疫荧光双染检测突触蛋白的表达量,Western blot检测海马中突触蛋白SYN1、突触后致密物PSD95、小胶质细胞特异性标志物IBA1、补体第一成分q(complement component 1,q subcomponent,C1q)、补体C3(complement component 3,C3)和补体受体3(complement receptor 3,CR3)的水平.结果:与空白组相比,模型组小鼠出现显著社交障碍(P<0.05)和焦虑表现(P<0.05),高尔基染色表明模型组树突棘数量增加(P<0.05),其中未成熟树突棘的百分比增加(P<0.05),免疫荧光双染显示小胶质细胞吞噬功能的下降(P<0.05)和突触蛋白数量的增加(P<0.05),Western blot中IBA1、PSD95和SYN1的表达升高(P<0.05),C1q、C3和CR3的表达降低(P<0.05).与模型组相比,督脉推法可以有效改善模型小鼠的社交障碍(P<0.05)和焦虑行为(P<0.05),降低IBA1、PSD95和SYN1的蛋白表达量(P<0.05),提高C1q、C3和CR3的蛋白表达量(P<0.05),加强小胶质细胞的吞噬功能,减少突触数量.结论:督脉推法对孤独症谱系障碍小鼠的社交行为有改善作用,通过增加经典补体通路中补体蛋白C1q和C3的表达从而增强小胶质细胞突触修剪功能,减少突触数量,是其发挥作用的机制之一.