摘要目的:评估短期储存条件(新鲜、-80℃冻存7 d及4℃保存7 d)对小鼠外周血单个核细胞(periph-eral blood mononuclear cells,PBMCs)和脾细胞流式细胞术检测抗体中位数荧光强度(median fluorescence intensity,MFI)及免疫细胞亚群百分比的影响.方法:取6只雄性昆明小鼠PBMCs和脾细胞悬液,均分成3组,在不同处理条件下检测,比较抗体MFI及单核细胞亚群(Ly-6clow/Ly-6cmedium/Ly-6chigh)、巨噬细胞(M1/M2)和树突状细胞等百分比的差异.结果:抗体MFI值变化具有抗体特异性和组织特异性.部分抗体(如PBMCs中的CD45和F4/80,脾脏中的CD115、Ly-6c、F4/80、CD80和MHC-II)在-80℃冻存后MFI与新鲜组接近,反之(如PBMCs中的7-AAD、CD115、Ly-6c和MHC-II,脾脏中的CD11b、CD206和CD11c)则在4℃保存后更接近新鲜组.多数检测抗体在储存后MFI显著改变.两种储存条件均导致PBMCs和脾脏活细胞百分比显著下降(PBMCs中-80℃组最低;脾脏中两储存组均下降约50%).PBMCs中总单核细胞、Ly-6cmedium/Ly-6chigh单核细胞、总巨噬细胞和树突状细胞百分比在4℃保存组最接近新鲜组.M1巨噬细胞和树突状细胞的百分比在两种储存条件组均显著低于新鲜组(P<0.05).脾脏中总单核细胞、Ly-6cmedium单核细胞、Ly-6chigh单核细胞、总巨噬细胞、M1/M2型巨噬细胞和树突状细胞的百分比在三组间均无显著差异(P>0.05),Ly-6clow单核细胞的百分比在新鲜样本组与-80℃冻存7 d组间无显著差异(P>0.05),但4℃保存7 d组相较于新鲜样本组则显著下降(P<0.05).结论:样本储存条件显著影响PBMCs和脾细胞的流式检测结果(MFI及细胞亚群百分比),且存在组织特异性.PBMCs中若重点关注免疫细胞亚群百分比(尤其是单核/巨噬/树突状细胞),4℃保存7 d更优;若需检测特定抗体(如CD45和F4/80)的MFI,-80℃冻存可能更佳.脾细胞中若需使多数抗体MFI值或关键亚群(如总单核/Ly-6chigh/总巨噬/树突状细胞)百分比接近新鲜样本,4℃保存7 d效果较好;若需检测特定抗体(如CD115和Ly-6c等)的MFI,-80℃冻存更优.