摘要目的:探究去甲基化酶烷基化修复同源蛋白5(alkylation repair homolog 5,ALKBH5)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)靶向修饰微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance protein 7,MCM7)对结直肠癌增殖与转移的影响.方法:通过RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色法检测ALKBH5在结直肠癌组织和癌旁组织的表达水平并进行生存分析.比较结直肠癌细胞系(HCT116、HT29、SW480和SW620)与正常肠上皮细胞系NCM460中ALKBH5表达差异.慢病毒转染构建ALKBH5稳定敲减和过表达细胞系,采用细胞计数实验、细胞集落形成和细胞周期检测实验测定ALKBH5对结直肠癌细胞侵袭和转移的影响并检测m6A水平变化.裸鼠皮下移植瘤和肝转移瘤模型检测过表达ALKBH5的体内作用.生物大数据分析、萤光素酶报告基因实验、m6A免疫共沉淀PCR和Western blot法验证ALKBH5靶向修饰MCM7.结果:与癌旁正常组织及正常肠上皮细胞系相比,ALK-BH5在结直肠癌组织及四种结直肠癌细胞系(HCT116、HT29、SW480和SW620)中表达均下降(P<0.05),预示着结直肠癌患者的预后更差.敲减ALKBH5显著促进HT29和SW620细胞增殖和迁移能力,增加m6A的含量,而其过表达则在体外和体内均抑制结直肠癌的生长和转移.ALKBH5通过m6A结合位点靶向修饰MCM7,敲减ALKBH5可显著增加MCM7表达而过表达ALKBH5则作用相反.MCM7在结直肠癌中表达水平上升,且MCM7过表达显著增强cyclin E1的表达.结论:ALKBH5通过降低MCM7 mRNA的m6A甲基化水平,下调MCM7的表达,进而抑制结直肠癌的增殖和转移.