摘要目的:探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)巨噬细胞样表型转换的影响及其与前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin型9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)信号通路的关系.方法:采用CCK-8法检测HSYA对VSMCs活力的影响以确定最佳给药条件.以1 mg/L LPS诱导VSMCs构建细胞模型,并将细胞随机分为正常对照(normal control,NC)组、LPS组、HSYA组和依洛尤单抗(evolocumab,EVO;PCSK9抑制剂)组.通过油红O染色和酶法检测细胞脂质沉积及总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)含量;采用West-ern blot和免疫荧光染色检测PCSK9、低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)及NLRP3炎症小体相关蛋白[NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain,ASC)和caspase-1]的表达与定位;通过RT-qPCR和Western blot检测炎症因子[肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-6]的表达.结果:与NC组比较,LPS可诱导VSMCs发生巨噬细胞样表型转换,细胞内TC和TG含量显著升高(P<0.01),PCSK9、NLRP3、ASC、caspase-1及炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)的表达显著上调(P<0.01),LDLR蛋白表达显著下调(P<0.01).与LPS组比较,HSYA和EVO干预均能显著减轻VSMC的脂质沉积,降低TC和TG含量(P<0.01);下调PCSK9蛋白表达并上调LDLR蛋白表达(P<0.01);抑制NLPR3炎症小体通路蛋白(NLRP3、ASC和caspase-1)的活化(P<0.01);同时减少上述炎症因子的基因转录和蛋白释放(P<0.01).结论:HSYA能够抑制LPS诱导的VSMCs巨噬细胞样表型转换,其作用机制可能与抑制PCSK9表达,进而阻断NLRP3炎症小体活化及下游炎症因子释放有关.本研究为HSYA抑制PCSK9/NLRP3信号通路,防治VSMCs表型转换及其相关的血管重构提供了新的实验依据.