换一批内源性膜联蛋白A6/A2协同参与小鼠运动性骨骼肌质膜损伤修复
Endogenous annexin A6 and annexin A2 cooperatively mediate repair of exercise-induced skeletal muscle plasma membrane injury in mice
摘要目的:探究膜联蛋白A6(annexin A6,AnxA6)在急性离心运动后小鼠骨骼肌质膜损伤修复中的作用特点和时程特征.方法:8周龄雄性C57/6J小鼠随机分为安静对照(control,Con)组、运动后即刻(immediate post-exercise,E0)组、运动后2 h(2 h post-exercise,E2)组、运动后6 h(E6)组、运动后24 h(E24)组、运动后48 h(E48)组和运动后72 h(E72)组,每组12只.急性下坡跑运动训练后,使用ELISA法测定血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)活性和AnxA6浓度,使用伊文思蓝(Evans blue dye,EBD)和横纹肌特异性细胞骨架适配蛋白1(Xin actin-binding re-peat-containing protein 1,Xirp1)染色观察股四头肌质膜和细胞骨架的损伤和修复程度,使用冰冻切片免疫荧光双标技术检测股四头肌AnxA6与AnxA1或AnxA2的共定位水平,使用Western blot法测定股四头肌AnxA6、AnxA1和AnxA2的蛋白表达量.结果:与Con组相比,E2组和E48组小鼠血清CK活性显著升高(P<0.05或P<0.01),E6组、E48组和E72组小鼠血清AnxA6浓度显著升高(P<0.05或P<0.01),E2组、E6组和E48组小鼠骨骼肌EBD阳性面积百分比(area percentage,%Area)显著升高(P<0.05或P<0.01),E6组小鼠骨骼肌Xirp1%Area显著升高(P<0.01).离心运动后,各组小鼠骨骼肌AnxA6、AnxA1和AnxA2的蛋白表达和AnxA6-AnxA1共定位水平均未发生显著变化(P>0.05);运动后6 h和48 h,AnxA6-AnxA2共定位水平显著升高(P<0.01).结论:急性离心运动后,AnxA6通过与AnxA2协同上膜参与小鼠骨骼肌质膜损伤修复,血清AnxA6的时程变化能够在一定程度上反映修复进度.
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