摘要目的:基于亚砷酸钠(NaAsO2)与四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化模型,探讨内质网应激(ERS)负调控因子Lin-12样抑制子/增强子(SEL1L)在肝纤维化中的作用及其对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)信号通路的调控机制.方法:使用C57BL/6J小鼠建立NaAsO2和CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型,随机分为NaAsO2模型组及其对应的磷酸盐缓冲液(PBS)组,CCl4模型组及其对应的橄榄油溶剂对照组,每组15只.采用HE及天狼星红染色评估小鼠肝脏病理变化;激光共聚焦显微镜观察小鼠肝脏中SEL1L、PERK及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平.体外培养人肝星状细胞(HSCs),使用慢病毒转染技术过表达SEL1L,分为正常组、NaAsO2组、转化生长因子β(TGF-β)组、NaAsO2+SEL1L过表达对照组、NaAsO2+SEL1L过表达组、TGF-β+SEL1L过表达对照组和TGF-β+SEL1L过表达组.Western blot法检测ERS相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、PERK、磷酸化PERK(p-PERK)、活化转录因子4(ATF4)和谷氨酰胺富含蛋白1(QRICH1)蛋白表达情况;光学显微镜观察细胞形态变化;免疫荧光观察各组细胞PERK的表达;蛋白质分子对接分析SEL1L与PERK蛋白结合方式;采用蛋白质免疫共沉淀和泛素化检测技术,分析SEL1L与PERK的相互作用及SEL1L对PERK泛素化水平的调控.结果:NaAsO2与CCl4诱导小鼠肝纤维化过程中,ERS相关PERK信号通路被激活伴随着SEL1L蛋白表达显著下调(P<0.01).NaAsO2及TGF-β在体外可促进HSCs发生ERS进而促进其活化增殖(P<0.01),抑制ERS可抑制HSCs活化(P<0.01).SEL1L通过直接结合PERK并促进其泛素化降解.结论:在NaAsO2与CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中,ERS负调控因子SEL1L表达下调,其通过直接结合PERK并促进其泛素化降解,进而抑制PERK信号通路过度激活与HSCs活化.