摘要目的:明确含三基序蛋白21(TRIM21)在对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠药物性肝损伤(DILI)模型中的作用.方法:在小鼠正常肝细胞AML12(细胞模型)和C57BL/6小鼠(动物模型)上构建APAP诱导的小鼠DILI模型.细胞模型以0、2.5、5、7.5和12.5 mmol/L的APAP刺激AML12细胞24 h后取样,构建细胞DILI模型;此外,通过瞬时转染小鼠TRIM21基因过表达的质粒(OE-TRIM21)构建TRIM21过表达小鼠细胞模型并以7.5 mmol/L的APAP刺激24 h后取样.以APAP(400 mg/kg)诱导不同时间(0、6、24和48 h)构建DILI动物模型;此外,通过尾静脉注射小鼠TRIM21基因过表达的腺相关病毒8(AAV8)构建小鼠肝脏过表达TRIM21模型后,腹腔注射APAP(400 mg/kg),24 h后取样.采用HE染色观察动物模型各组中的肝损伤程度.通过血清生化、Western blot、RT-qPCR和免疫组化染色等技术检测细胞和动物模型各组中的TRIM21、抗氧化通路关键转录因子核因子E2相关因子2(NRF2)、醌氧化还原酶1(NQO1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、修饰亚基(GCLM)以及谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)、细胞色素P450 2E1(CYP2E1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、细胞周期抑制蛋白p21和p16、增殖细胞核抗原(PCNA)与细胞周期蛋白(cyclin A、cyclin D和cyclin E)的mRNA和蛋白表达.结果:在APAP诱导的小鼠细胞及动物DILI模型中,TRIM21的mRNA和蛋白水平均显著上调(P<0.05),且功能研究显示,TRIM21过表达显著加剧了APAP引起的小鼠肝细胞损伤.具体主要表现为:下调NRF2及其下游靶分子NQO1、GCLC、GCLM和GPX3的表达(P<0.05),进而显著削弱抗氧化能力;显著上调CYP2E1(P<0.05),进一步增强APAP毒性代谢;促进HMGB1的释放;显著上调p21和p16,同时抑制PCNA、cyclin A、cyclin D和cyclin E(P<0.05),进而促进细胞周期阻滞.结论:在APAP诱导的小鼠DILI模型中,TRIM21呈高表达,且过表达TRIM21加剧APAP诱导的小鼠药物性肝损伤,显著减弱抗氧化能力,并增强毒性代谢,同时还促进细胞周期阻滞.