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下颌功能性前伸后髁突部RANKL、MMP-2、MMP-9及VEGF水平变化的实验研究

Changes of RANKL,MMP-2,MMP-9 and VEGFlevels in condylar process following functional mandibular protrusion:an experimental study in vitro for rats

摘要目的 研究功能性矫正器引导大鼠下颌功能性前伸后髁突部核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)的水平变化.方法 选择健康SD大鼠20只,分为实验组和对照组,每组10只,对实验组大鼠进行下颌功能性前伸模型建造,正常对照组大鼠不做处理,自然生长.将两组大鼠于3、5、7d时分别处死,选取髁突及周围3mm组织作为实验标本,对两组大鼠 3、5、7d的组织标本进行检测:(1)酶联免疫吸附法检测RANKL的水平,测量牙间距离;(2)行HE染色光镜下观察组织学图像;(3)免疫组化染色光镜下观察MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白的表达情况;(4)Western blot法检测MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白相对表达量.结果 实验组大鼠5、7d时RANKL水平明显低于对照组(P<0.05,P<0.01),且实验组大鼠5、7d时的牙间距离明显大于对照组(P均<0.01).实验组大鼠5、7d组织标本可见髁突软骨层结构紊乱、细胞排序散乱且发生软骨部分脱落,软骨厚度相比对照组大鼠普遍增加.免疫组化染色结果显示,实验组大鼠髁突部3、5d时的MMP-2 及3d时的MMP-9、VEGF蛋白表达与对照组相比差异无统计学意义;7d时的MMP-2和5、7d时的MMP-9、VEGF蛋白表达明显低于对照组.Western blot结果显示,实验组大鼠髁突部3、5d时MMP-2和3d时MMP-9、VEGF表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P均>0.05);5d时MMP-2及5、7d时MMP-9、VEGF表达水平显著低于对照组(P<0.05,P<0.01).结论 RANKL、MMP-2、MMP-9和VEGF在下颌功能前伸后可能参与髁突部的骨重建和骨形成过程,对其水平的检测或可为髁突部的骨重建提供重要的参考价值.

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