换一批摘要目的 利用甲基化CpG 结合蛋白(MBD)与甲基化CpG 岛特异性结合并相互作用的特性,建立一种高效、简便富集甲基化DNA 序列的方法.方法 首先应用PCR 扩增获得MeCP2基因的MBD编码序列,在大肠杆菌中诱导表达重组的GST MBD,采用GlutathioneSepharose4B (GSH Beads)获得了高纯度的GST MBD.并在不同盐浓度缓冲液体系中加入一定量用甲基化酶M.SssI处理过的DNA片段.结果 不同NaCl盐浓度和pH 值可以影响甲基化程度不同的DNA 结合量,最佳结合条件是400～500mM NaCl,pH7.9.结合的甲基化DNA 可以用高盐浓度(1M)进行有效洗脱.结论 该方法能够充分区分甲基化与非甲基化DNA,可以用于无创性产前诊断.
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DOI
10.3969/j.issn.1674-7399.2008.01.009
发布时间
2010-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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