缺氧缺血海马组织中自噬相关蛋白Beclin-1和LC3的表达变化以及雷帕霉素对其表达的影响
Changes in expression of autophagy-related proteins, Beclin-1 and LC3, and effects of rapamycin on their expression in hypoxic-ischemic hippocampus
摘要目的:观察缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠在不同时间点海马组织中自噬相关蛋白Beclin-1及LC3的表达变化,并探讨雷帕霉素对上述蛋白表达的影响。方法将生后7 d的108只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、HIBD组和雷帕霉素组,每组36只。采用改良Rice法建立HIBD模型;假手术组分离左侧颈总动脉但不予结扎,不行低氧处理;雷帕霉素组在模型制作前1 h予腹腔注射雷帕霉素(0.5 mg/kg)。各组大鼠分别于模型制作结束后0、6、12、24、48、72 h时间点麻醉后断头取脑,采用Western blot法检测大鼠海马组织Beclin-1及LC3蛋白表达的变化。结果 HIBD组Beclin-1蛋白及雷帕霉素组Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均从0 h起开始升高,24 h时达到峰值后回落;HIBD组LC3-Ⅱ蛋白表达水平从0 h起开始升高,12 h时达到峰值后回落。与假手术组相比,HIBD组及雷帕霉素组Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平在各时间点均显著升高(P<0.05);与HIBD组相比,除12 h时LC3-Ⅱ蛋白水平外,雷帕霉素组各时间点Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论海马组织细胞经缺氧缺血后出现自噬激活,而雷帕霉素能增强自噬这一表达过程。
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