换一批摘要篇首：1 材料和方法1.1 内皮细胞培养 取新生儿脐带，收集内皮细胞。于37℃5%CO2培养箱内用含20%胎牛血清的M199培养基培养(含青霉素50 ku/L、链霉素100 mg/L、谷氨酸 2 mmol/L和GIBCO BRL)。采用形态及CD33免疫组织化学方法鉴定。1.2 Northern blot分析 取第2～4代内皮细胞，以5.0×104个/cm2接种于1%胎牛血清的M199培养基中培养48 h后，给予血管内皮细胞生长因子(VEGF)培养24 h，采用异硫氰酸胍酸酚一步法提取总RNA。紫外分光光度计测定RNA浓度。胶原基因IODN探针设计为5’-GGAGCTCCTGGGCCTCAGCC-3’；GAPDH探针设计为5’-TGAAGGTCGGAGTCAACGGA-3’。取15 μg RNA作变性甲醛电泳，转印于硝酸纤维膜，以鱼精DNA做预杂交，采用T4 DNA核苷酸激酶同位素标记反义ODN探针做杂交。经Northern blot印迹杂交放射自显影后，采用光密度扫描仪扫描，得该标本VEGF mRNA水平(以GAPDH为内对照)。实验重复3次，每次每组设6孔。
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主题词
内皮, 血管(Endothelium, Vascular)细胞(Cells)胞间信号肽类和蛋白质类(Intercellular Signaling Peptides and Proteins)胶原(Collagen)基因(Genes)
分类号
R329.28
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-3949.2001.02.011
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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