阿米洛利抑制载脂蛋白A1诱导小鼠巨噬细胞ABCA1的降解
Amiloride Inhibits the Degradation of Apolipoprotein Al-induced ABCA1 in Mice Macrophage
摘要目的 探讨钠氢交换体1抑制剂阿米洛利对载脂蛋白A1(ApoA1)诱导小鼠三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)降解的影响.方法 给小鼠静脉注射ApoA1后不同时间点收集腹腔巨噬细胞,定量实时聚合酶链反应及Western blot检测巨噬细胞ABCA1 mRNA及蛋白水平变化.进而,ApoA1干预8h小鼠给予腹腔注射阿米洛利或钙蛋白酶抑制剂ALLN,实验分为4组:对照组、阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组,Westem blot检测巨噬细胞ABCA1蛋白水平,荧光法检测钙蛋白酶活性.结果 ApoAl干预小鼠后ABCA1 mRNA无明显改变,而ABCA1蛋白水平迅速升高,8h达高峰后逐渐降低.阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组ABCA1蛋白水平均比对照组高;在0、4、8h时间点,阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组间ABCA1蛋白水平差异无统计学意义;而在12、16 h时间点,阿米洛利+ALLN组ABCA1蛋白水平较阿米洛利组、ALLN组升高.与对照组比较,阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组钙蛋白酶活性均降低;阿米洛利组、ALLN组、阿米洛利+ALLN组3组组间比较,钙蛋白酶活性各时间点均无明显差异.结论 阿米洛利在活体内抑制ApoA1诱导ABCA1蛋白降解及钙蛋白酶活性,提示钠氢交换体1可能至少部分通过改变钙蛋白酶活性参与ABCA1的降解.
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