Ezrin基因沉默通过降低Calpain-1活性抑制血管紧张素Ⅱ诱导的ABCA1降解

Ezrin silencing inhibits angiotensin Ⅱ-induced ABCA1 decrease by reducing calpain-1 activity

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摘要目的探讨埃兹蛋白(Ezrin)基因表达降低对RAW264.7钙激活中性半胱氨酸蛋白酶(Calpain-1)活性及三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响.方法实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测靶向作用于Ezrin基因的小干扰RNA(siRNA)的抑制效率.Western blot法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及联合加入Ezrin siRNA后Calpain-1的蛋白表达水平变化.Western blot法检测AngⅡ及联合加入Calpain抑制剂N-乙酰基-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸(ALLN)、Ezrin siRNA后对ABCA1蛋白表达水平的影响.结果 Ezrin siRNA转染组较对照组Ezrin的mRNA和蛋白表达均下调(P＜0.05).Western blot结果显示AngⅡ可上调Calpain-1的活性(4.92±0.23比1.00±0.17,P＜0.05),而Ezrin siRNA可逆转Calpain-1的活性上调(0.23±0.21比4.92±0.23,P＜0.05).此外,AngⅡ处理后ABCA1蛋白表达下调(0.167±0.055比0.732±0.072,P＜0.05),这种作用可被Ezrin siRNA逆转(0.611±0.048比0.167±0.055,P＜0.05),而给予Calpain抑制剂ALLN干预未能进一步提高ABCA1蛋白水平.结论 Ezrin可能通过Calpain-1途径在AngⅡ诱导的ABCA1表达降低过程中发挥重要作用.