PCSK9在多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞中的表达研究

Study on the expression of PCSK9 in ovarian granulosa cells with polycystic ovary syndrome

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摘要目的研究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)在多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞中的表达情况,并探讨PCSK9表达与PCOS卵巢组织以及睾酮处理的KGN细胞中脂质状况的关系.方法通过来曲唑联合高脂饲料喂养构建PCOS大鼠模型,油红O染色观察PCOS大鼠卵巢组织中脂质分布情况;生物信息学分析筛选PCOS卵巢与正常卵巢转录组数据中参与脂质代谢通路的差异表达基因;采用免疫组织化学和Western blot技术检测PCSK9蛋白在PCOS卵巢组织中的表达情况;采用免疫荧光、qRT-PCR和Western blot技术检测不同浓度睾酮处理的KGN细胞中PCSK9和低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达差异;免疫荧光显微镜观察KGN细胞对Dil-LDL的摄取能力.结果油红O染色结果显示PCOS卵巢组织中颗粒细胞上的脂滴分布较正常卵巢组织明显减少;生物信息学分析结果显示PCOS大鼠卵巢组织中上调的PCSK9主要参与胆固醇代谢通路;免疫组织化学和Western blot结果显示PCSK9蛋白主要定位于颗粒细胞且在PCOS大鼠颗粒细胞中表达增加;免疫荧光、qRT-PCR和Western blot结果显示KGN细胞中PCSK9的表达随睾酮浓度的增加而增加,LDLR的表达随睾酮浓度的增加而减少;睾酮(100 nmol/L)可减弱KGN细胞对Dil-LDL的摄取能力.结论 PCSK9在PCOS卵巢颗粒细胞中高表达,其可导致LDLR蛋白表达降低,使颗粒细胞脂质摄取不足.