换一批小鼠脑血管平滑肌细胞和内皮细胞的联合提取与鉴定
Combined extraction and identification of mouse brain vascular smooth muscle cells and endothelial cells
摘要[目的]建立一种高效且稳定的原代小鼠脑血管平滑肌细胞和内皮细胞的分离方法,为脑血管病发病机制和治疗方法的探究提供实验材料.[方法]通过葡聚糖梯度离心联合酶消化法分离脑血管平滑肌细胞,再通过免疫磁珠分选分离脑血管内皮细胞.使用倒置相差显微镜观察两种细胞的形态和生长特征,通过免疫荧光鉴定纯度,通过CCK-8法观察传代后生长和增殖特性.在细胞功能层面,通过血管形成实验评估内皮细胞血管形成能力,通过迁移实验评估平滑肌细胞对血小板源性生长因子(PDGF)的反应性.[结果]采用本方法分离出的两种细胞生长旺盛,状态良好.平滑肌细胞表现出典型的"峰谷状"生长,免疫荧光结果显示胞质内平滑肌特异性α-SMA和SM22α表达阳性;内皮细胞表现出典型的"铺路石"样生长,血小板内皮细胞黏附分子CD31和闭锁小带蛋白1表达阳性.[结论]本研究建立了一种高效同时分离两种脑血管细胞的可靠方法,分离细胞纯度高,活性良好,且传代后特征稳定,足以满足后续实验需求.
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关键词
脑血管内皮细胞脑血管平滑肌细胞葡聚糖梯度离心联合酶消化法免疫磁珠分选brain vascular smooth muscle cellbrain vascular endothelial celldextran gradient centrifugation with enzymatic digestionimmunomagnetic beads sorting
栏目名称
DOI
10.20039/j.cnki.1007-3949.2024.09.008
发布时间
2024-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
北京市自然科学基金面上项目（7182065）
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