换一批
换一批犬瘟热病毒和犬腺病毒2型双重PCR方法的建立及应用
Establishment and rudimentary application of a duplex-PCR for Detection of CAV-2-CDV
摘要根据犬瘟热病毒（canine distempervirus，CDV）和犬腺病毒2型（Canineadenovirus type2，CAV-2）GeneBank登陆的基因序列各设计一对引物，经试验条件优化，建立了检测CAV-2的PCR方法和CDV的RT-PCR方法，CAV-2可扩增1108bp片段、CDV可扩增560bp的目的片段，特异性试验表明建立的方法只能特异扩增CAV-2和CDV，不能扩增犬细小病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、犬钩端螺旋体和犬黄胆出血群、狂犬病病毒。敏感性试验表明，所建立的双重PCR方法可以扩增4．63ng总核酸量。在上述试验基础上继续优化条件建立了能同时检测CAV-2和CDV两种病毒的双重PCR检测方法，并用该方法检测来自辽宁、吉林等15家动物医院134份鼻液和眼眵样品，与商品化试纸条检测结果相比，本方法更加敏感和方便。研究结果表明，本实验建立的方法敏感、特异，适用于动物犬瘟热病毒和犬腺病毒2型的快速检测和鉴别诊断。
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