换一批病毒性出血性败血症病毒（VHSV）实时荧光环介导等温扩增检测方法的建立
Establishment of Real-time Fluorescence LAMP Assay for Viral Hemorrhagic Septicemia Virus
摘要 根据VHSV的较为保守的glyG基因，设计了三套LAMP引物，筛选出扩增效率最优的第二套引物VHSV-2，引入其环引物以加快其反应。采用ESE-Quant tube scanner（德国QIAGEN公司）恒温实时荧光反应及检测平台，反应温度为63℃，恒温下30 min内可得出结果。同时评价VHSV引物的灵敏度和特异性，灵敏度结果显示其检测限可达到4.5 pg每反应，与几种重要的病原RNA均无交叉反应。本文建立的检测VHSV的RT-LAMP检测方法简单、易操作，同时具有较高的灵敏度和特异性。本研究建立的实时荧光RT-LAMP检测方法可作为VHSV的快速诊断工具，适合VHSV的现场快速检测和大规模监控。
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