换一批空肠弯曲杆菌ERIC-PCR分型技术研究
Study on construction and application of ERIC-PCR method for typing Campylobacter jejuni
摘要目的：建立空肠弯曲杆菌肠杆菌科基因间重复一致序列PCR（ERIC-PCR）的分子分型技术，快速分析空肠弯曲杆菌指纹谱。方法本研究提取空肠弯曲杆菌ATCC33560的基因组DNA作为模板，采用对优化项目设置梯度其它条件不变的方法，对ERIC-PCR反应中的模板量、引物浓度和退火温度等进行优化，建立空肠弯曲杆菌的ERIC-PCR分型技术，并采用该技术对20株空肠弯曲杆菌的指纹图谱进行了分析。结果 ERIC-PCR反应体系中DNA模板量96ng/25μL，ERIC1、ERIC2引物浓度各0.8μmol/L，退火温度40℃时，指纹图谱条带清晰、明亮；20株空肠弯曲杆菌临床分离株ERIC-PCR指纹图谱差异较大，可在160bp~32000bp范围内出现2条~13条条带，分为14型。结论研究显示成功建立了空肠弯曲杆菌ERIC-PCR指纹图谱分型技术，应用该方法可从分子水平上对空肠弯曲杆菌基因组DNA进行快速指纹图谱分析，具有简便和快速等优点，能够为空肠弯曲杆菌流行病学调查提供科学依据。
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