换一批液相芯片技术同时检测六种猪繁殖障碍病毒的方法研究
Establishment of a Multiplex Supension Array for Simultaneous Detection of Six Kinds of Porcine Reproductive Failure Virus
摘要在GenBank中收集猪细小病毒（PPV）结构蛋白VP2基因、猪圆环病毒2型（PCV2）的ORF2序列、猪伪狂犬病毒（PRV）的gB基因、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的NSP2基因、猪瘟病毒（CSFV）的E2基因和乙型脑炎病毒（JEV）的M基因，利用Primer 5.0等分子生物学软件对收集的序列分析比较，筛选出上述基因的特异保守序列并设计引物和探针，将设计好的探针与相应的微球偶联，优化条件，建立检测方法。结果表明：建立的检测PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV 6种病毒核酸的多重液相芯片技术具有较好的特异性、敏感性和稳定性，对PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV 6种病毒核酸的最低检出量分别为8.50×102 copies/μL、2.87×102 copies/μL、2.07×102 copies/μL、2.61×102 copies/μL、2.34×102 copies/μL、2.05×102 copies/μL，与相应病毒PCR/RT-PCR检测方法相比，敏感性提高了100~1000倍；对临床388份样品同步进行荧光PCR与液相芯片检测，结果99.87%相符。本方法为液相芯片技术在动物多病毒快速高通量检测、鉴别诊断等应用方面奠定了基础。
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分类号
S851.3
DOI
10.3969/j.issn.1005-944X.2016.12.022
发布时间
2016-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
上海市市级农口系统青年人才成长计划（2014）
上海市生猪产业技术体系(沪农科产字第6号)（2016）
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