羊溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌双重PCR鉴别检测方法的建立与应用

Establishment and Application of a Dual PCR for Mannheimia haemolytica and Pasteurella multocida in Sheep

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摘要溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)和多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是两种条件性致病菌,可导致多种临床症状,给羊产业造成一定经济损失.为临床上快速、准确地鉴别诊断这两种细菌所导致的疾病,根据Mh的Lkt基因和Pm的kmt基因分别设计引物,建立了在一个反应体系中同时鉴别检测这 2 种细菌的PCR方法.结果显示:建立的PCR鉴别检测方法对Mh、Pm基因组DNA的检测限分别为7.23×10-6、6.99×10-5 ng/μL,对羊链球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、羊支原体核酸检测均为阴性,在多次重复试验中均可检测出阳性样品,其反应试剂均扩增出预期大小的片段.对95份羊源疑似临床样品进行检测,Mh检出率为 38.95%(37/95),Pm检出率为 53.68%(51/95),混合感染检出率为 12.63%(12/95),鉴别检测结果与单重PCR检测结果基本一致.结果表明:该方法具有较好的特异性、敏感性、重复性及稳定性,可用于临床检测,为羊呼吸道疾病的鉴别诊断提供了一种方便、快捷和准确的检测手段,具有良好的临床应用前景.

作者张峰源 ^[1] 夏贵泉 ^[2] 孟卫芹 ^[3] 邓凤林 ^[4] 王金良 ^[3] 刘建钗 ^[2] 学术成果认领

作者单位河北工程大学生命科学与食品工程学院,河北邯郸 056000;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州 256600 ^[1] 河北工程大学生命科学与食品工程学院,河北邯郸 056000 ^[2] 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州 256600 ^[3] 深圳市康百得生物科技有限公司,广东深圳 518000 ^[4]

关键词溶血性曼氏杆菌多杀性巴氏杆菌 PCR 羊 Mannheimia haemolytica Pasteurella multocida PCR sheep

分类号 S851.3

栏目名称 技术支撑

DOI 10.3969/j.issn.1005-944X.2024.10.018

发布时间 2024-11-14

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