首页 > 中国动物检疫 > 猪圆环病毒2型和弓形虫双重TaqMan荧光定量PCR法的建立及应用

猪圆环病毒2型和弓形虫双重TaqMan荧光定量PCR法的建立及应用

Establishment and Application of a Dual TaqMan Fluorescence Quantitative PCR Assay for Simultaneous Detection of Porcine Circovirus Type 2 and Toxoplasma gondii

二维码有效期 120s

摘要猪圆环病毒2型(PCV2)感染和弓形虫病(toxoplasmosis)在临床症状上具有一定的相似性因而难以准确辨别.为建立可同时鉴别PCV2和弓形虫(Toxoplasma gondii,Tox)的检测方法,针对PCV2 ORF2和Tox基因组529重复序列(RepG529)设计特异性引物和TaqMan探针,经过优化引物、探针浓度和反应条件,建立了同时检测这两种病原的双重TaqMan荧光定量PCR方法.该方法仅特异性扩增PCV2和Tox,与其他病原无交叉反应,特异性强;对PCV2质粒标准品的最低检测限为1.21×101 copies/μL,对Tox质粒的最低检测限为1.17×1 01 copies/μL,具有较高的敏感性;组内和组间变异系数均小于5%,具有良好的重复性.应用本试验建立方法和国标荧光定量PCR方法同时检测187份血清、脾脏临床样品,结果PCV2和Tox的阳性符合率分别为93.33%和1 00%.该方法的建立为PCV2和Tox的批量、快速和特异性鉴别检测提供了技术支撑.

作者王海燕 ^[1] 仇德洋 ^[2] 蔺雅婷 ^[1] 杜建才 ^[3] 姚方方 ^[3] 吕延飞 ^[4] 刘洋 ^[4] 郑佳 ^[4] 学术成果认领

作者单位青岛农业大学动物医学院,山东青岛 266109 ^[1] 青岛农业大学动物医学院,山东青岛 266109;鲁南制药集团股份有限公司新药安评中心,山东临沂 273499 ^[2] 鲁南制药集团股份有限公司新药安评中心,山东临沂 273499 ^[3] 德州市畜牧兽医事业发展中心,山东德州 253000 ^[4]

关键词猪圆环病毒2型弓形虫双重荧光定量PCR PCV2 Toxoplasma gondii dual fluorescence quantitative PCR

分类号 S851.3

栏目名称

技术支撑

DOI 10.3969/j.issn.1005-944X.2025.06.015

发布时间 2025-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

山东省生猪产业技术体系项目（SDAIT-08-07）