换一批6种非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测试剂盒的比对
A Comparative Study on the Performance of 6 Brands of Fluorescent Quantitative PCR Kits for African Swine Fever Virus
摘要为评估不同荧光定量PCR试剂盒对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的检测性能,以ASFVP72基因假病毒核酸质控品为标准物质,系统比较了6种试剂盒(A-F)的线性相关系数(R2)、扩增效率(E)、检出限(LOD)、分析特异性及反应条件等指标.结果显示:6种试剂盒的R2均大于0.980,LOD为3.8～60.8 copies/μL,与猪场常见病毒核酸均无交叉反应;E分别为88.74％、90.23％、75.41％、82.72％、88.16％、91.76％,仅B与F试剂盒为90％～110％;在LOD重复性试验(n=20)中,A、B、D、E试剂盒检出率均大于95％,而C、F试剂盒分别仅为50％和65％.此外,各试剂盒在检测时长(56～84 min)和模板添加量(5或10μL)方面存在差异.结果表明,6种试剂盒均具有良好的线性关系、分析特异性,但在E、LOD及LOD重复性方面存在一定差异.建议兽医实验室在使用试剂盒前对其性能进行科学评估.本研究为养殖场和兽医实验室选择ASFV荧光定量PCR检测试剂盒提供了参考.
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