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猪细小病毒巢式PCR检测方法的建立

Establishment of a Nested PCR Assay for Porcine Parvovirus

摘要为建立猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)的鉴别检测方法,针对编码PPV非结构蛋白1的基因(NS1)序列,分别设计了1对内套引物和1对外套引物,经优化反应条件,成功建立了PPV巢式PCR检测方法.该方法仅能特异性扩增PPV,对其他猪源病毒扩增均呈阴性,特异性好;对PPV重组质粒的检测限为5.60×101 copies/μL,灵敏度高;组内和组间试验中,在同等扩增条件下,均出现同样的目的条带,重复性好.应用本研究建立的方法对76份临床样品进行检测,并将其检测结果与常规PCR进行比对,符合率为96.05%.结果表明,本研究建立的PPV巢式PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为PPV感染的临床检测和及时防控提供了技术支撑.

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