三种鼠不同结构p53 minigene瞬时转染H1299细胞对其生长的影响
Study on the growth of H1299 cell line transfected transiently with mouse p53 minigenes with different codon 172 structures
摘要目的 比较一个位点不同碱基的鼠p53minigene对细胞生长的影响。方法 三种小鼠p53minigene[野生型(Arg)、假野生突变型(Leu)和突变型(His)]真核表达载体,由LipofectAMINE介导转染p53缺失的H1299细胞,在转染后不同时间点收集细胞,利用细胞计数、流式细胞术、蛋白免疫印迹等方法比较三种p53对细胞体外生长的影响。结果 在转染后不同时间点,野生型和假野生突变型p53均能诱导细胞凋亡和周期阻滞,并可转录激活Bax、p21WAF1和Mdm-2,突变型则无以上效应。结论 野生型和假野生突变型p53具有诱导肺癌细胞凋亡和引起周期阻滞的功能,这种作用可能是通过转录激活Bax和p21WAF1而实现,Mdm-2与野生型和假野生型p53可以反馈调节。172Leu和172His两种突变表现出截然不同的生物学效应,支持p53基因存在保留野生型抑瘤功能突变方式的观点。
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