沉默NGAL基因对肺癌细胞迁移及侵袭的影响
Effect of Inhibiting NGAL Gene Expression on A549 Lung Cancer Cell Migration and Invasion
摘要背景与目的 检测NGAL在肺癌组织的表达,观察小干扰RNA(siRNA)沉默NGAL基因表达对肺癌细胞增殖及侵袭能力的影响.方法 应用免疫组织化学检测肺癌组织中NGAL表达.通过RNAi技术干扰NGAL后,运用定量PCR、Western blot技术,观察干扰NGAL基因效率.干扰NGAL后,MTT检测细胞增殖、Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力,细胞划痕愈合能力,免疫荧光及Western blot方法检测上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关的蛋白E-cadherin及Vimentin的表达情况.结果 肺癌中NGAL阳性率高于癌旁组织(P<0.01).NGAL-siRNA转染组,癌细胞中NGAL基因及蛋白水平表达都受到明显的抑制.NGAL-siRNA转染组细胞增殖能力,迁移及侵袭能力相对于对照组都降低,差异具有统计学意义(P<0.05).干扰NGAL,E-cadherin的表达升,Vimentin的表达水平降低.干扰NGAL,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平降低.结论 NGAL在肺癌组织高表达,且在肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移及EMT过程中起着重要作用.NGAL可能是肺癌浸润和转移的一个重要参考指标,可为肺癌治疗提供潜在的靶点.
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