摘要背景与目的 非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)术后复发率较高,传统肿瘤原发灶-淋巴结-转移(tumor-node-metastasis,TNM)分期难以充分反映其生物学异质性,乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)在肿瘤进展及免疫微环境重塑中发挥重要作用,但其在不同淋巴结转移状态下的空间分布特征及对术后复发的预后意义尚不明确.本研究旨在探讨NSCLC患者原发灶中的表达HIF-1α的肿瘤细胞、CD4+T细胞及CD8+T细胞的密度差异,以及对淋巴结转移及患者术后复发的影响.方法 回顾性收集2014年1月1日至2018年12月31日在山东第一医科大学附属肿瘤医院行根治性手术的256例NSCLC患者的术后石蜡包埋原发灶组织标本,构建包含肿瘤中心(tumor center,TC)和侵袭边缘(invasive margin,IM)区域的组织微阵列,并应用多重免疫荧光染色技术[HIF-1α/CD4/CD8/细胞角蛋白(cytokeratin,CK)/4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)]定量表达HIF-1α的肿瘤细胞(HIF-1α+CK+)、表达HIF-1α的CD4+T细胞(HIF-1α+CD4+)及表达HIF-1α的CD8+T细胞(HIF-1α+CD8+)的密度.采用Mann-Whitney U检验分析N0与N1-2组、N1与N2组中的细胞密度差异,Cox比例风险回归模型分析关键复发因子.结果 研究最终纳入256例IA-IIIB期NSCLC患者,中位随访时间为37.05个月,其中87例(34.0%)患者在随访期间复发.在NSCLC患者的TC及IM区域,与N0组相比,N1-2组HIF-1α+CK+细胞密度均更高(P分别为0.039、<0.001),HIF-1α+CD8+细胞密度均更低(P分别为<0.001、<0.001);与N1组相比,N2组原发灶内TC区域和IM区域HIF-1α+CK+细胞、HIF-1α+CD4+细胞及HIF-1α+CD8+细胞的密度差异均无统计学意义(均P>0.05).多因素Cox分析显示,在N0组患者中,TC区域低HIF-1α+CD8+密度是NSCLC患者复发的独立危险因素[风险比(hazard ratio,HR)=1.998,95%CI:1.077-3.705,P=0.028].在N1、N2组患者中,TC区域和IM区域HIF-1α+CK+密度、HIF-1α+CD4+、HIF-1α+CD8+密度与NSCLC患者复发无统计学关联.结论 在NSCLC患者中淋巴结转移与原发灶HIF-1α相关细胞亚群密度变化密切关联.原发灶TC区域中HIF-1α+CD8+细胞密度降低与N0期NSCLC患者术后复发显著关联,可作为术后风险分层的潜在免疫学指标.