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    首页 > 中国防痨杂志 > Rv2653c在大肠埃希菌中的克隆与表达研究

    Rv2653c在大肠埃希菌中的克隆与表达研究

    Clonging and expression of rv2653c gene of M.tuberculosis in E.coli

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    摘要目的 从H37Rv标准株克隆出结核菌Rv2653c基因并进行表达与初步分析.方法 根据H37Rv基因组序列合成引物,以PCR方法钓取Rv2653c基因,克隆到pGEM-T上,挑取阳性克隆进行测序,将正确编码基因克隆到pET24b载体上,在BL21大肠埃希菌菌株中以IPTG诱导表达重组蛋白.以金属螯合层析初步分离纯化重组蛋白,采用western blot方法对重组抗原进行抗原性初步分析.结果 首先获得了重组的Rv2653c编码的蛋白,表达产率不低于20%,初步纯化纯度约90%,以人血清进行的western blot分析发现,Rv2653c重组蛋白有较好的抗原性.结论 获得了Rv2653c重组蛋白为进一步寻探讨其功能及应用价值奠定基础.

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    作者 李邦印 [1] 孙卫国 [1] 程小星 [1] 孙昌文 [1] 熊志红 [1] 王仲元 [1] 王金河 [1] 苏锐 [1] 学术成果认领
    作者单位 解放军第309医院结核病研究室,北京,100091 [1]
    关键词 分枝杆菌,结核大肠埃希菌细菌蛋白质类重组蛋白质类
    主题词 大肠(Intestine, Large)结核(Tuberculosis)研究(Research)蛋白(Egg White)细菌蛋白质类(Bacterial Proteins)
    分类号 R5
    发布时间 2011-01-06
    基金项目
    国家传染病重大专项
    • 浏览212
    • 被引4
    • 下载1
    中国防痨杂志

    中国防痨杂志

    2010年32卷11期

    752-755页

    ISTICPKUCSCDCA

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