换一批
换一批结核分枝杆菌耐药相关基因扩增多重PCR体系的建立与评估
Establishment and evaluation of the multiplex PCR systems for amplifying Mycobacterium tuberculosis genes involved in drug resistance
摘要目的 建立结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系,评估该体系以临床分离株DNA和痰菌DNA为模板扩增耐药相关基因的成功率.方法 常规提取结核分枝杆菌临床分离株(47株)及涂阳肺结核患者(21例)痰菌DNA.根据目前研究已发现的结核分枝杆菌耐药相关基因合成引物,建立2个多重PCR体系以扩增目的基因.扩增片段经测序证实后,计算该体系用于两种样本的扩增成功率.结果 针对临床常用8种抗结核药物,选取结核分枝杆菌rpoB、katG、inhA、embB、gyrA、rpsL、rrs、eis共8个耐药相关基因设计合成引物.建立2个多重PCR体系扩增8个耐药基因,该体系扩增47株结核分枝杆菌临床分离株DNA和21例菌阳肺结核患者痰菌DNA的成功率分别为100.0%(47/47)和76.2%(16/21).结论 本研究建立了高效扩增8个结核分枝杆菌耐药基因的多重PCR体系,结果对进一步研发结核病耐药分子诊断产品具有重要意义.
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关键词
结核,抗多种药物性聚合酶链反应基因测定核酸扩增技术技术评估,生物医学Tuberculosis,multidrug-resistantPolymerase chain reactionGenetic testingNucleic acid amplification techniquesTechnology assessment,biomedical
主题词
结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)基因(Genes)结核(Tuberculosis)基因扩增(Gene Amplification)药用制剂(Pharmaceutical Preparations)
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1000-6621.2017.08.002
发布时间
2017-09-27
基金项目
"十二五"国家科技重大专项
重大传染病防治协同创新中心项目
北京市自然科学基金
北京市科技新星计划
北京市医院管理局"青苗"计划专项
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