换一批
换一批摘要目的 探究免疫刺激促进人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)介导的孤独症谱系障碍(ASD)的分子机制.方法 首先利用慢病毒感染构建稳定敲低PTEN的神经干细胞系和神经元细胞系,随后通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测免疫刺激对敲低PTEN的神经干细胞中Akt信号通路的影响.用稳定敲低PTEN的神经干细胞进行MTT实验和EdU掺入实验,检测免疫刺激对神经干细胞增殖能力的影响,通过RT-qPCR和流式细胞术检测免疫刺激对敲低PTEN的神经干细胞分化的影响.利用稳定敲低PTEN的神经元细胞系,检测免疫刺激对神经元突触形成的影响.结果 在稳定敲低PTEN的神经干细胞中,免疫刺激能够促进Akt的磷酸化,并且影响下游如mTOR和GSK3的表达或活性,激活Akt信号通路.免疫刺激促进了神经干细胞的增殖能力,并且抑制了神经即干细胞向神经元细胞的分化过程.对稳定敲低PTEN的神经元细胞进行免疫刺激,神经元细胞突触的数量和最大长度均明显提高,促进了神经元细胞突触的形成.结论 免疫刺激可以激活神经干细胞中的Akt信号通路,促进神经干细胞增殖,影响神经干细胞的分化方向,并且免疫刺激促进了神经元细胞突触形成,影响了 PTEN介导的ASD.
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