miR-183在HPV相关型宫颈腺癌中的表达及其对LRIG1蛋白的调节作用研究
The Expression of miR-183 and the regulation of miR-183 on LRIG1 protein in HPV-associated adenocarcinoma of cercix
摘要目的 探讨miR-183在HPV相关型宫颈腺癌中的表达及与富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域基因1(LRIG1)的相互作用关系.方法 实时定量PCR法检测HPV相关型宫颈腺癌组织中miR-183及LRIG1 mRNA的表达水平,Western blot法检测腺癌组织中LRIG1蛋白的表达.将miR-183 inhibitors(抑制物)、miR-183 mimics(模拟物)应用阳离子脂质体Lipofectamine TM2000转染至宫颈腺癌Hela细胞,并设立空白对照组、各自的阴性对照组,采用实时定量PCR法检测各组细胞中miR-183及LRIG1 mRNA的表达水平,Western blot法检测宫颈各组细胞中LRIG1蛋白的表达水平.结果 miR-183 mR-NA在HPV相关型宫颈腺癌组织中的表达(0.91±0.10)明显高于正常宫颈组织(0.52±0.06),差异有统计学意义(P<0.05),而LRIG1的mRNA(0.56±0.03)及蛋白(0.09±0.02)表达水平均明显低于正常宫颈组织(mRNA:1.12±0.08,蛋白:0.25± 0.05),差异有统计学意义(P<0.05).与对照组(1.06±0.06)相比,转染miR-183抑制物的腺癌Hela细胞中miR-183 mRNA的表达水平(0.69±0.07)显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),转染miR-183抑制物的腺癌Hela细胞和对照组中,LRIG1 mRNA(分别为1.75±0.10、0.71±0.09)及其蛋白(分别为1.16±0.09、0.76±0.04)的表达水平反而均明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组(0.99±0.05)相比,转染miR-183模拟物的宫颈腺癌Hela细胞中miR-183 mRNA的表达水平(2.55±0.25)显著增高(P<0.05),转染miR-183模拟物的腺癌Hela细胞和对照组中LRIG1 mRNA(分别为0.40±0.05、0.75± 0.08)及其蛋白(分别为0.32±0.01、0.76±0.06)表达水平反而均明显降低(P<0.05).结论 miR-183在HPV相关型宫颈腺癌中呈高表达,可能通过抑制LRIG1的表达参与宫颈腺癌的发生和发展.
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