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法医DNA多重qPCR定量技术研究进展

Research progress on multiplex qPCR quantification technology for forensic DNA

摘要法医 DNA 检验中,检材常具有微量、降解、混合及 PCR 抑制等特征,单一浓度指标难以满足后续分型决策需求.本文综述多重实时荧光定量PCR(Quantitative Real-Time PCR,qPCR)在法医DNA 定量中的技术演进、检测原理、应用价值及主流试剂盒的关键性能.该技术以定量循环数(Quantification Cycle,Cq)-模板量关系为定量基础,结合 TaqMan 水解探针和多通道荧光检测,同步评估人源总 DNA、男性 DNA、降解相关靶标(用于计算降解指数,Degradation Index,DI)及内部 PCR对照(Internal PCR Control,IPC)信号.其在混合斑迹筛查、降解和抑制检材评估、个体识别与亲缘鉴定质控、人源性筛查及检验分流中具有重要作用.未来,该领域亟需完善阈值解释与标准化验证,借助数字 PCR(Digital PCR,dPCR)加强定量结果的计量溯源与标准化,并持续推动多维靶标集成、自动化工作流及与下游分型技术的深度融合.

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