海水中诺如病毒富集与活病毒检测技术优化
Optimization of norovirus concentration and infectivity detection methods in seawater
摘要目的 建立并优化一种针对贝类增养殖区海水样本的简单高效的诺如病毒富集和检测技术,以应对全球性食品安全隐患,并满足传染病精准防控的需求.方法 以鼠诺如病毒为实验对象,采用基于纳米氧化铝陶瓷滤芯的富集技术,结合新型叠氮溴化丙啶(PMAxx)核酸染色剂和实时定量PCR(PMAxx-qPCR)技术检测活病毒.首先使用滤芯膜富集病毒,通过Tralk洗脱液初步浓缩,再利用PEG沉淀法二次浓缩.评价并比较本实验与传统的细胞培养技术检测效果.结果 本富集方法在浓缩体积5000倍的情况下,回收率可达到3.24%;PMAxx染色剂浓度50 μmol,避光孵育15 min、光照10 min后进行实时定量PCR扩增,检测诺如病毒活病毒效果最佳.结论 本文建立并优化的诺如病毒富集和检测方法,显著提高了诺如病毒的回收率和检测准确性,对提升食品安全检测水平和传染病防控具有重要意义.
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