分型悬液芯片检测疟原虫的方法建立及应用
Development and application of liquid bead array method for the detection of plasmodium
摘要目的 建立一种基于悬液芯片技术的疟原虫检测和分型方法,对4种疟原虫进行快速检测和鉴定.方法 依据国家生物技术信息中心(NCBI)公开数据库上4种疟原虫的特异管家基因序列信息,设计并合成相关引物探针序列.抽提核酸DNA,经PCR扩增,产物与核酸探针微球组杂交后于BioPlex200检测荧光信号值. 结果 优化了PCR方法,间日疟原虫(Pv)、三日疟原虫(Pm)的悬液芯片检测敏感性约9DNA拷贝,恶性疟原虫(Pf)、卵形疟原虫(Po)的悬液芯片检测敏感性约90DNA拷贝.进而将本方法用于检测30份临床样本,其检测结果与分型特异荧光PCR方法完全一致,而且在混合感染样本的快速检测中具有显著的优势.结论 建立的可同时检测4种疟原虫的悬液芯片方法特异性高,省时,无交叉反应.为快速筛查和鉴定疟原虫提供了新的手段.
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