云南省华宁县荒川库蠓形态和遗传多态性研究

Morphological and genetic polymorphism of Culicoides arakawae of Huaning county, Yunnan province

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摘要目的了解云南省荒川库蠓形态多样性及遗传多态性.方法 2015年7月在云南省华宁县采集库蠓样本,制备压片进行形态学鉴定,同时提取基因组DNA,用细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因和间隔区-1(ITS-1)基因特异引物进行PCR扩增和序列测定,采用Clustal X、DNAStar和Mega 6.1等软件进行核苷酸同源性和遗传进化分析.结果共采集到库蠓955只,其中12只库蠓在R1和R2室下端多出1个淡斑,翅面共有15个淡斑;另外943只库蠓翅面有14个淡斑.对12只翅面有15个淡斑的库蠓(A组)和14只翅面有14个淡斑的库蠓(B组)进行形态学和分子生物学鉴定,26只库蠓均具有两复眼分离、小眼面间无柔毛、触角第15节无嗅觉器、1个大梨形受精囊、翅面有小圆形淡斑的形态学特征.两组库蠓的HR和TR2值差异有统计学意义(P＜0.05),而AR、PR、CR和TR1、TR3值的差异均无统计学意义(P＞0.05).CO Ⅰ基因和ITS-1基因遗传进化分析显示26只库蠓与荒川库蠓亲缘关系最近;但是在CO Ⅰ基因进化树上26只库蠓分为明显的两个进化簇,其中14只库蠓(B组)形成1个单独的进化簇,与另一进化簇核苷酸同源性在94％以下.结论云南省华宁县除了荒川库蠓外,还存在1种翅面有形态差异的变种库蠓以及CO Ⅰ基因序列差异较大的荒川库蠓,提示该地区荒川库蠓的形态学和遗传学具有多态性.