结缔组织生长因子促进半月板无血管区损伤愈合

Enhancement of meniscal tearing damage repairing in the avascular zone using connective tissue growth factor (CT-GF) in the rabbit model

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摘要目的：探讨结缔组织生长因子（CTGF）对纤维软骨细胞外基质分泌、VEGF表达及促进半月板无血管区的损伤修复中的作用。方法：将新西兰大白兔半月板白区，经胶原酶消化、离心分离后，提取半月板纤维软骨细胞，培养至第2代。用流式细胞仪鉴定该细胞表面CD31，CD44，CD45和CD105标志物，并用Ⅱ型胶原抗体做免疫细胞化学鉴定，以证明所培养、传代的细胞是纤维软骨细胞。分别将细胞培养在浓度100 ng/ml的CTGF培养基中3、14 d后，通过实时定量聚合酶链反应，检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原和VEGF基因的表达变化情况。造模，在兔半月板中央区，制作长3 mm的纵行撕裂。将45只大白兔随机分为3组，处理方式为：半月板单纯缝合术，缝合术加填充PBS-纤维蛋白胶，缝合术加填充1．5滋g CTGF-纤维蛋白胶。术后第1、4、10周用荧光免疫组织化学分析法显示Ⅰ型、Ⅱ型胶原和VEGF在损伤处的表达与分布情况，直观撕裂处的愈合情况。结果：体外实验第14天，定量RT-PCR结果显示，100 ng/ml CTGF组中的Ⅰ型、Ⅱ型胶原和VEGF mRNA表达比PBS对照组，明显增加。体内实验的荧光免疫组织化学结果显示，在术后第10周，CTGF治疗组中的Ⅰ型、Ⅱ型胶原和VEGF已完全填充撕裂损伤处。 PBS-蛋白胶组中，损伤处仍有明显裂隙。结论：CTGF可促进半月板无血管区重要的细胞外基质（Ⅰ型、Ⅱ型胶原）的合成，同时损伤处VEGF的表达活性明显增强，有利于促进无血管区半月板撕裂损伤的愈合。

作者何蔚 ^[1] 刘明 ^[1] 青祖宏 ^[1] 高巍 ^[1] 刘玉杰 ^[2] 黄潇楠 ^[3] 学术成果认领

作者单位 解放军 305 医院骨科,北京,100017 ^[1] 解放军总医院骨科,北京,100853 ^[2] 首都师范大学化学系,北京,100037 ^[3]

关键词结缔组织生长因子纤维软骨细胞半月板血管内皮生长因子类胶原Ⅰ型胶原Ⅱ型 Connective tissue growth factors (CTGF)Fibrochondrocyte Meniscus Vascular endothelial growth factors(VEGF)Collagen typeⅠ Collagen typeⅡ

主题词胶原(Collagen)半月板(Meniscus)结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor)创伤和损伤(Wounds and Injuries)细胞(Cells)

栏目名称 基础研究

DOI 10.3969/j.issn.1003-0034.2013.08.017

发布时间 2013-09-27

基金项目

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