换一批慢病毒介导沉默信息调节因子1基因表达增高的骨髓间充质干细胞模型建立
Establishment of a bone marrow mesenchymal stem cells cell model with lentivirus-mediated silent information regulator sirtuin 1 gene overexpression
摘要目的:利用携载大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)基因的慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),构建SIRT1基因表达增高的BMSCs模型.方法:设计合成大鼠SIRTi基因序列,包装成可感染的慢病毒,用不同感染复数(MOI)的慢病毒感染大鼠BMSCs,筛选出适宜的MOI值后,在经慢病毒感染的BMSCs中通过RT-PCR检测SIRT1基因mRNA含量,通过细胞免疫组化检测慢病毒感染的BMSCs中SIRT1蛋白的表达情况.结果:成功构建LV-SIRT1慢病毒,病毒滴度为1×109TU/mL,其感染大鼠BMSCs后,与对照组相比,SIRT1基因mRNA的相对表达量增高4.71倍,过表达效率为471％(P＜0.05),且从细胞免疫组化结果中可见,慢病毒过表达组的染色较深,SIRT1蛋白表达高.结论:成功构建SIRTI基因表达增高的BMSCs模型,为骨科相关疾病的研究提供了细胞模型基础.
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关键词
骨髓间充质干细胞慢病毒感染沉默信息调节因子1基因Bone Marrow Mesenchymal Stem CellsLentivirus InfectionSilent Information Regulator Sirtuin 1 Gene
分类号
Q28（细胞生物学—子类）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-9958.2023.12.11
发布时间
2024-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（82102568）
国家自然科学基金（82172432）
国家自然科学基金（82001319）
深圳市科技研发资金（KCXFZ20201221173411031）
广东省基础与应用基础研究基金（2021A1515012586）
北京大学深圳医院科研基金（KYQD2021099）
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