换一批Hint2基因过表达质粒的构建及其对肝癌细胞BEL-7402迁移的影响
Construction of Hint2 overexpression plasmid and its effect on invasion capability of liver cancer cell BEL-7402
摘要目的 探讨Hint2基因过表达质粒的构建及其对肝癌细胞BEL-7402迁移的影响.方法 根据Hint2基因设计引物,扩增Hint2基因全长并以pcDNA3.1(+)为载体构建Hint2过表达质粒.转染BEL-7402细胞提取mRNA和总蛋白,分别使用Real-time PCR和Western blot检测转染细胞Hint2 mRNA和蛋白质表达的变化,应用免疫荧光染色法对细胞中Hint2蛋白与细胞线粒体进行共定位.使用划痕愈合实验检测Hint2过表达后对肝癌细胞BEL-7402迁移能力的影响.结果 转染Hint2过表达质粒细胞的Hint2 mRNA和蛋白表达显著上调,免疫荧光染色表明过表达的Hint2蛋白定位于线粒体.划痕愈合实验表明Hint2过表达质粒使肝癌细胞BEL-7402迁移速率显著降低.结论 Hint2过表达质粒能够上调BEL-7402细胞中Hint2 mRNA和蛋白质的表达水平,表达的蛋白定位于细胞线粒体并抑制肝癌细胞的迁移.
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DOI
10.3969/j.issn.1674-7380.2018.03.001
发布时间
2018-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31301204）
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