换一批
换一批不同组织来源间充质干细胞体外成骨分化能力的比较研究
Comparison of the osteogenesis capacity of mesenchymal stem cells from different tissues
摘要目的 比较成人脂肪间充质干细胞(ASCs)、脐带间充质干细胞(UC-MSCs)和成人骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨能力,选择优势干细胞种类作为应用于骨组织工程治疗骨缺损的种子细胞.方法 采用含10％胎牛血清的DMEM/Ham'sF-12培养液培养3种MSCs.取3种MSCs的P3代,通过CCK8方法检测其增殖能力;通过流式细胞仪进行鉴定;通过碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色检测骨分化蛋白ALP的分泌和矿化钙结节的沉积,并对钙结节进行定量分析;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测骨再生相关基因的表达.结果 3种P3代MSCs在3～5d之间增殖均处于对数生长期;流式鉴定3种细胞的表面标志物阳性率:CD44、CD90和CD105均高于97％,阴性率:CD14、CD34和CD45均低于1％;ALP染色结果显示3种MSCs成骨诱导9d时,细胞内均表达ALP,茜素红染色结果显示成骨诱导18d时,均呈现较好的矿化能力,BMSCs和UC-MSCs成骨诱导后形成的钙结节无显著性差异;RT-qPCR结果显示3种MSCs成骨诱导组相比较于对照组,成骨再生相关基因Osterix、ALP、Ⅰ型胶原(COL1)和骨钙素(OCN)均显著性高表达;3种MSCs成骨诱导9d时,UC-MSCs实验组的COLI基因表达显著性高于BMSCs,成骨诱导18d时,ASCs实验组的Osterix基因表达显著性高于BMSCs.结论 ASCs和UC-MSCs具有一定的成骨矿化能力,有望成为骨组织工程治疗骨缺损的种子细胞.
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关键词
脂肪间充质干细胞骨髓间充质干细胞脐带间充质干细胞骨组织工程种子细胞Adipose-derived stem cellsBone marrow mesenchymal stem cellsHuman umbilical cord mesenchymal stem cellsBone tissue engineeringSeed cells
分类号
R68
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006-7108.2017.05.001
发布时间
2017-07-26
基金项目
天津市自然科学基金（14JCYBJC43900）
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