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Wnt/β-catenin通路在FSHβ增强BMP9诱导间充质干细胞成骨分化的作用研究

The study of the Wnt/β-catenin on FSHβ enhanced BMP9-induced mesenchymal stem cells osteogenesis

摘要目的 探讨Wnt/β-catenin通路在促卵泡激素β亚基(follicle-stimulating hormoneβ-subunit,FSHβ)增强骨形成蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的作用.方法 C3H10T1/2细胞为研究对象,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色方法检测Ad-GFP对照组、Ad-FSHβ实验组、Ad-BMP9实验组、Ad-BMP9+Ad-FSHβ实验组或Ad-BMP9+Ad-FSHβ+XAV-939实验组等各研究组ALP表达;茜素红S染色(alizarin red s,ARS)方法检测各研究组钙盐小节沉积;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)技术检测各研究组cyclin D1转录.结果 单独的Ad-FSHβ实验组骨形成早、晚期标志物(ALP和钙盐小结)与Ad-GFP对照组相比无显著差异;单独的Ad-BMP9实验组中,两者的表达均高于Ad-GFP对照组;Ad-FSHβ与Ad-BMP9联合实验组的表达量较Ad-BMP9实验组显著增加.检测各研究组Wnt/β-catenin通路的靶基因cyclin D1的转录,与Ad-GFP对照组相比,Ad-FSHβ实验组的表达无显著变化,Ad-BMP9实验组的表达水平显著升高(P<0.01),Ad-FSHβ与Ad-BMP9联合实验组cyclin D1 mRNA表达量显著高于Ad-BMP9实验组(P<0.01).Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV-939处理后,Ad-BMP9与XAV-939联合实验组cyclin D1 mRNA的水平较Ad-BMP9实验组下降(P<0.01),Ad-FSHβ、Ad-BMP9与XAV-939三者联合实验组水平也较Ad-FSHβ与Ad-BMP9联合实验组下降(P<0.05).ALP的表达呈现出与cyclin D1转录相似的变化趋势.结论 Wnt/β-catenin通路可能在促卵泡激素β亚基增强骨形成蛋白9诱导MSCs成骨分化中起重要作用.

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中国骨质疏松杂志

中国骨质疏松杂志

2020年26卷12期

1773-1778页

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