温肾健脾方通过HIF-1α信号通路防治骨质疏松症的作用机制
The mechanism of treating osteoporosis through HIF-1α signaling pathway by Wen Shen Jian Pi prescription
摘要目的 观察温肾健脾中药在防治骨质疏松症(osteoporosis,OP)过程中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的改变,探索温肾健脾方对OP的防治机制.方法 随机将30只雄性大鼠分为正常组、模型组、中药组,每组10只.模型组采用尾部悬吊+氢化可的松注射+番泻叶灌胃+饮食失节的方法构建脾肾阳虚型OP模型,中药组同时灌胃8周.双能X线检测大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)含量,免疫荧光检测骨组织中CD31、EMCN的含量,RT-PCR检测肾、骨、肠中CD31、EMCN、HIF-1α的mRNA含量变化,蛋白质印迹检测肾、骨、肠中HIF-1α的蛋白水平.结果 与正常组相比,模型组BMD降低,ALP、TRACP升高,肾、骨及肠CD31及EMCN的mRNA表达降低,肾、骨组织HIF-1α的mRNA及蛋白表达升高,NOTCH1蛋白表达降低,肠组织HIF-1α的mRNA表达增加,但蛋白表达降低;与模型组相比,中药组BMD升高,ALP、TRACP的含量下降,但ALP的效果不明显,肾、骨组织CD31、EMCN蛋白表达升高,HIF-1α表达降低,NOTCH1蛋白表达增加,肠组织HIF-1α的mRNA表达降低,但蛋白表达升高.结论 脾肾阳虚型OP动物模型构建成功,且温肾健脾方能够改善骨质疏松症,促进H型血管生成,调节OP大鼠肾、骨组织HIF-1α、NOTCH1表达,其机制可能与HIF-1α信号通路调节H型血管生成有关.
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