换一批骨松汤含药血清对H2O2诱导成骨细胞铁死亡的影响及机制
Effects and mechanism of Gusong Decoction-Containing serum on H2O2-induced ferroptosisin osteoblasts
摘要目的 探究骨松汤含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)铁死亡的影响及其作用机制.方法 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)筛选骨松汤含药血清和铁抑制素-1(Fer-1)处理浓度.选择合适剂量的骨松汤含药血清和Fer-1干预,荧光探针检测亚铁离子(Fe2+)和活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平及碱性磷酸酶(ALP)活性;比色法检测谷胱甘肽(GSH)水平;茜素红S染色检测钙结节吸光度(OD)值;免疫印迹检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰-CoA合成酶4(ACSL4)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)蛋白表达.细胞过表达NOX4,检测铁死亡相关指标(GPX4和ACSL4蛋白表达、GSH水平、MDA含量)和细胞成骨功能(ALP活性和钙结节OD值).结果 H2O2诱导MC3T3-E1细胞铁死亡.与H2O2组相比,骨松汤含药血清和Fer-1干预显著提高了细胞存活率、SOD和CAT活性、GSH水平以及GPX4蛋白表达(P＜0.05),降低细胞MDA含量、Fe2+和ROS水平以及NOX4与ACSL4蛋白表达(P＜0.05).NOX4过表达抑制了骨松汤含药血清对H2O2处理MC3T3-E1细胞铁死亡和成骨功能的保护作用.结论 骨松汤含药血清能够抑制H2O2诱导的MC3T3-E1细胞铁死亡,这可能与其抑制NOX4/ROS信号通路活化有关.
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关键词
骨松汤含药血清过氧化氢MC3T3-E1细胞铁死亡NOX4成骨细胞Gusong Decoction-containing serumH2O2MC3T3-E1 cellsferroptosisNOX4osteoblasts
分类号
R285.5（中药学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006-7108.2025.10.001
发布时间
2025-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（82374490）
河南省卫生健康委国家中医临床研究基地科研专项（2021JDZX2121）
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