GSK-1520489A对骨髓间充质干细胞影响实验研究
Experimental study of the effect of GSK-1520489A on bone marrow mesenchymal stem cells
摘要目的 观察和比较不同浓度的 GSK-1520489A 对人骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响.方法 从人骨髓中分离培养出骨髓间充质干细胞,分别用 0、50、100、150、200、250、300、350、400 nmol/mL 浓度的 GSK-1520489A 处理 BMSCs,运用细胞计数试剂盒(CCK8)法检测 GSK-1520489A 对骨髓间充质干细胞的活性影响;蛋白质印迹法(Western blot)检测经 GSK-1520489A 处理的人骨髓间充质干细胞中成骨标志物蛋白碱性磷酸酶(ALP)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红 S(alizarin red,ARS)染色鉴定 GSK-1520489A 对 BMSCs 的成骨分化.通过 Western blot 检测 GSK-1520489A 促进骨髓间充质干细胞成骨分化的机制.结果 当GSK-1520489A 浓度为 200 nmol/mL 时,BMSCs 的活性[(87.207±4.214)%]与对照组(0 nmol/mL)相比,无统计学差异(P>0.05),GSK-1520489A 浓度在 0~200 nmol/mL 范围时,Western Blot 显示成骨因子 ALP 和矿化因子 OPN 的表达随着 GSK-1520489A 浓度的增加逐渐增强.ALP 和 ARS 染色结果显示,GSK-1520489A 促进 BMSCs 成骨分化.结论 GSK-1520489A 通过 Wnt/β-catenin 通路促进了 BMSCs 的成骨分化,且浓度在 0~200 nmol/mL 内,分化能力随着浓度的增加逐渐增强.
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